发色或漂白用非食用物质测定方法探究

食品中常常含有着色物质或因天然色素的不稳定而变色，影响食品的外观或质地。通过添加发色或漂白剂，可以使着色物质分解，达到改善食品外观或质地的目的。这些物质有的是食品中允许使用的添加剂，有的是未被允许在食品中使用的非食用物质，如硼砂及硼酸、溴酸钾及甲醛等。

硼酸的分子式H₃BO₃，相对分子质量61.83，是白色粉末状结晶或三斜轴面鳞片状光泽结晶，有滑腻手感，无臭味。溶于水、酒精、甘油、醚类及香精油中，水溶液呈弱酸性。主要用作硼硅酸玻璃、医药、搪瓷、釉、染料以及化妆品等原料。

硼砂又名硼酸钠十水盐，它的化学成分是四硼酸钠，分子式Na₂B₄O₇·10H₂O，相对分子质量381.37，无色半透明晶体或白色结晶粉末。无臭，味咸。易溶于水、甘油中，微溶于酒精。有毒，对大鼠口服（折合硼酸）LD₅₀为3.3g/kg。具有保鲜、防腐、增加韧性、脆度、护色以及改善食品保水性和保存性的作用，因此被不法分子添加于腐竹、肉丸、凉粉、面条、虾等食品中。毒理学实验表明，硼酸和硼砂可在体内蓄积，排泄很慢，连续摄取会在体内蓄积，妨害消化酶作用，引起食欲减退、消化不良、抑制营养素吸收，促进脂肪分解，因而使体重减轻，其中毒的临床症状主要表现在心血管、神经、胃肠、生殖泌尿、体温调节和皮肤等多个方面，具体为呕吐、腹泻、红斑、循环系统障碍、休克、昏迷等所谓的硼酸症。

硼砂及硼酸的检测方法主要有分光光度法、焰色反应法、化学电化学方法、快速检测试剂盒法等。本文介绍食品中硼酸的测定国标方法（GB 5009.275-2016）：乙基己二醇－三氯甲烷萃取姜黄比色法。

（一）实验原理

通过乙基己二醇－三氯甲烷溶液对样品中的硼酸进行快速的富集、萃取，除去共存盐类的影响，利用浓硫酸与姜黄混合生成的质子化姜黄与硼酸反应生成红色产物。溶液颜色的深浅与样品中硼酸含量成正比，通过比色可以测定样品中硼酸的含量。在酸性条件下硼砂以硼酸形式存在，所以该方法也可以反映食品中添加硼砂的含量。

（二）试剂和仪器

1.试剂

（1）所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或同等纯度的水。

（2）浓硫酸；硫酸（1+1）溶液；无水乙醇；亚铁氰化钾溶液（称取106.0g亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至1000mL）。

（3）乙酸锌溶液 称取220.0g乙酸锌，加30mL冰乙酸溶于水，并稀释至1000mL。

（4）姜黄－冰醋酸溶液 称取姜黄色素0.10g溶于100mL冰乙酸中，此溶液保存于塑料容器中。

（5）乙基己二醇－三氯甲烷溶液 取2－乙基－1，3－己二醇10mL，加三氯甲烷稀释至100mL，此溶液保存于塑料容器中。

（6）硼酸标准储备液 准确称取在硫酸干燥器中干燥5h后的硼酸0.5000g，溶于水并定容至1000mL，保存于塑料容器中。此硼酸标准储备液的浓度为500μg/mL。

（7）硼酸标准溶液 取硼酸标准储备液10.00mL，加水定容至1000mL，此溶液保存于塑料容器中。此硼酸标准使用溶液的浓度为5μg/mL。所配制溶液于0～4℃冰箱中可储存3个月。

2.仪器

分光光度计，高速捣碎机，100mL塑料容量瓶，150mL塑料烧杯，25mL和50mL带盖塑料试管，涡旋振荡器。

（三）实验步骤

1.标准曲线的绘制

准确量取硼酸标准溶液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00mL于25mL塑料试管中，各加水至5mL。加硫酸（1+1）溶液1mL，振荡混匀。然后加乙基己二醇－三氯甲烷溶液5.00mL，盖上盖子，涡旋振荡器振摇约2min，静置分层，吸取下层的乙基己二醇－三氯甲烷溶液通过直径7cm干燥快速滤纸过滤。

各取1.00mL过滤液于50mL塑料试管中，依次加入姜黄－冰乙酸溶液1.0mL、浓硫酸0.5mL，摇匀，静置30min，加无水乙醇25mL，静置10min后，于550nm处1cm比色皿测定吸光度。以标准系列的硼酸量（μg）为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

2.样品处理

（1）固体样品 称取经高速捣碎机捣碎的样品2.00～10.00g（精确到0.01g），加40～60mL水混匀，缓慢滴加2mL浓硫酸，超声10min促进溶解混合。加乙酸锌溶液5mL、亚铁氰化钾溶液5mL，加水定容至100mL，过滤后作为样品溶液。根据样品含量取1.00～3.00mL样品溶液于25mL塑料试管中，加水至5mL。加硫酸（1+1）溶液1mL，振荡混匀。接着加乙基己二醇－三氯甲烷溶液5.00mL，盖上盖子，涡旋振荡器振摇约2min，静置分层，吸取下层的乙基己二醇－三氯甲烷溶液并通过直径7cm干燥快速滤纸过滤。过滤液作为样品测试液。

（2）液体样品 称取样品2.00～10.00g（精确到0.01g），加水定容至100mL，作为样品溶液。蛋白质或脂肪含量高的液体样品可加乙酸锌溶液5mL、亚铁氰化钾溶液5mL，加水定容至100mL，过滤后作为样品溶液。根据样品含量取1.00～3.00mL样品溶液于25mL塑料试管中，加水至5mL。加硫酸（1+1）溶液1mL，振荡混匀。接着加乙基己二醇－三氯甲烷溶液5.00mL，盖上盖子，涡旋振荡器振摇约2min，静置分层，吸取下层的乙基己二醇－三氯甲烷溶液并通过直径7cm干燥快速滤纸过滤。过滤液作为样品测试液。

3.样品测定

准确吸取样品测试液1.00mL于50mL塑料试管中，以下操作同标准曲线中显色、比色步骤。以测出的吸光度在标准曲线上查得试样液中的硼酸量。

4.结果计算

按式（6-4）计算试样中硼酸的含量

式中 X——样品中硼酸的含量，mg/kg；

m₁——试样测定液中硼酸质量，μg；

V₁——试样定容体积，mL；

m——样品量，g；

V₂——测定用试样体积，mL；

F——换算为硼砂的系数，硼酸系数为1，硼砂系数为1.54。计算结果保留三位有效数字

（四）注意事项

如果萃取过程出现乳化现象，可以用3000r/min离心3min或在测定体系中加入1mL无水甲醇以避免乳化或沉淀现象（加水定容总体积为5mL）。

溴酸钾为无色三角晶体或白色结晶性粉末，相对分子质量167.01。溶于水，微溶于醇，不溶于丙酮。主要用作分析试剂、氧化剂、食品添加剂、羊毛漂白处理剂。溴酸钾作为面粉处理剂，不仅可以使面包更白，而且可以使面包更膨松更漂亮。20世纪末发现过量食用会损害人的中枢神经、血液及肾脏，并确定溴酸根是一种氧化性致癌物，主要能导致动物的肾和膀胱组织发生癌变。溴酸钾对眼睛、皮肤、黏膜有刺激性，口服后可引起恶心、呕吐、胃痛、呕血、腹泻等，严重者发生肾小管坏死和肝脏损害，高铁血红蛋白血症，听力损害。大量接触可致血压下降。现将溴酸钾列为非食用物质，禁止包括在小麦粉在内的任何食品中使用。

溴酸钾的测定方法有亚硫酸盐滴定法、碘滴定法、分光光度法、化学发光法、液相色谱法、气相色谱法、气质联用法等。其中GB/T 20188-2006小麦粉中溴酸盐的测定——离子色谱法是食品中可能违法添加的非食用物质黑名单中指定的分析方法。

（一）实验原理

用纯水提取样品中溴酸根离子，经Ag/H柱除去样品提取液中干扰氯离子（Cl^－）、超滤法除去样品提取液中水溶性大分子，采用离子交换色谱－电导检测器测定，外标法定量。

（二）试剂与仪器

1.试剂

（1）除另有说明外，所用试剂为分析纯，所用高纯水质量为18.2MΩ·cm。

（2）硫酸溶液50g/L；硝酸银溶液50g/L；氯化钠溶液质量分数0.5%。

（3）强酸型阳离子交换树脂（H型）732强酸型阳离子交换树脂（总交换容量≥4.5mmol/g）用水浸泡，用5倍体积去离子水洗涤3次、用1倍体积甲醇洗涤、再用5～10倍体积高纯水分数次洗涤，至清洗水无色澄清后，尽量倾出清洗水，加入2倍体积的硫酸溶液（3∶1），用玻璃棒搅拌1h，使树脂转为H型，先用去离子水洗至接近中性，然后用高纯水洗，至清洗水的pH约为6，将树脂转入广口瓶中并覆盖高纯水备用。

（4）强酸型阳离子交换树脂（Ag型）取一定量处理好的H型阳离子交换树脂，加入2倍体积的硝酸银溶液（3∶2），用玻璃棒搅拌1h，使树脂转成Ag型，先用5倍体积去离子水分数次洗涤，然后用5～10倍体积的高纯水分数次洗涤树脂，用0.5%氯化钠溶液检验清洗水，直至不出现白色浑浊为止，将树脂转入广口瓶中覆盖高纯水备用。

（5）层析柱0.8cm（内径）×10cm（高）层析管。

（6）标准储备溶液（1000μg/mL）准确称取KBrO₃基准试剂（相对分子质量167.00，含量≥99.9%）0.1310g，用高纯水溶解并定容至100mL，配成含1000μg/mL标准储备液，置于棕色瓶中4℃下保存可稳定2个月。

（7）BrO₃^－标准稀释液（100μg/mL）吸取BrO₃^－标准储备液10.0mL，用高纯水定容至100mL，BrO₃^－浓度为100μg/mL。

（8）BrO₃^－标准工作曲线溶液 分别取BrO₃^－标准稀释液0、0.5、1.0、l.5、2.0、2.5、3.0mL，用高纯水定容至50mL，该标准工作曲线浓度为：0、l.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0。若采用200μL大体积进样时，标准工作曲线溶液需进行适当稀释。

（9）相关阴离子标准储备溶液 配制与小麦粉基底相关的阴离子储备液，如表6-5所示。

注：可选项，该储备溶液供配制阴离子标准混合工作溶液时使用。

（10）相关阴离子标准混合工作溶液 配制与小麦粉基底相关的阴离子标准混合工作溶液，如表6-6所示。

注：可选项，该标准榕液供调整柱分离条件和观察柱清洗条件时使用。

（11）石油醚 分析纯，沸程30～60℃。

表6-5 相关离子标准储备液的配制

表6-6 相关离子标准混合工作液的浓度

2.仪器

（1）离子色谱仪，配电导检测器；超声波清洗器；振荡器；离心机：4000r/min（50mL离心管）；10000r/min（1.5mL离心管）；分析天平：感量0.1mg；移液器：0.1～1mL；0.2μm水性样品过滤器。

（2）超滤器 截留相对分子质量10000（MWCO 10000），样品杯容量0.5mL；进样量为200μL时使用容量为4mL样品杯。

注：可采用millipore microcon YM－10型，Amicon Ultra－4型及同等性能的超滤器。

（三）实验步骤

1.提取

（1）小麦粉 准确称取10g（精确至0.1g）小麦粉于250mL具塞三角瓶中，加入100.0mL高纯水，迅速摇匀后置振荡器上振荡20min（或在间歇搅拌下于超声波中提取20min），静置，转移20mL上层液于50mL离心管中，3000r/min离心20min，上清液备用。

（2）含油脂较多的试样 准确称取10g（精确至0.1g）于100mL烧杯中，加入30mL×3次石油醚洗去油脂，倾去石油醚，样品经室温干燥后按（1）“加入100.0mL高纯水……上清液备用”操作。

（3）包子粉、面包粉等小麦粉品质改良剂 根据含量的不同准确称取0.2～1g（精确至0.001g），用高纯水溶解并定容至50.0mL，经0.2μm的水性样品滤膜过滤后直接进行色谱测定。

2.净化

Ag/H柱去除样品提取液中的Cl^－：将H型树脂慢慢倒入关闭了出水口的层析柱中，用玻璃棒搅动树脂赶出气泡，并使树脂均匀地自然沉降，装入2mL树脂后（约3cm高），再慢慢装入2mL Ag型树脂，不要冲击已沉降的H型树脂，尽量保持两层树脂界面清晰，待Ag型树脂完全沉降后，打开出水口，控制流速为2mL/min，加10mL高纯水冲洗，待柱中的水自然流尽后，立即将准备好的样品溶液沿柱内壁加入，不要冲击树脂表面，弃去前5mL流出液，收集其后2mL流出液进行下一步净化。若使用商品化（OnGuardn Ag/H）脱Cl^－柱时，按产品说明书操作。对Cl^－含量在1g/kg以下的小麦粉，也可省略此步操作。

超滤法去除样品提取液中的水溶性大分子：将收集液经0.2μm的水性样品滤膜过滤后注入超滤器样品杯中，于10000r/min下离心30min进行超滤，超滤液直接进行色谱分析。按以上规定的条件进行空白小麦粉实验。

3.离子色谱参考条件

（1）梯度色谱条件 色谱柱：DIONEX IonPac © AS194mm×250mm（带IonPac © AG194mm×50mm保护柱）；流动相：DIONEX EG50自动淋洗液发生器，OH^－型；抑制器：DIONEX ASRS 4mm阴离子抑制器；外加水抑制模式，抑制电流100mA；检测器：电导检测器，检测池温度：30℃；进样量：根据样液中BrO₃^－含量选择进样20～200μL。

淋洗液OH^－浓度：如表6-7所示。

表6-7 淋洗OH^-浓度表

（2）梯度色谱条件 色谱柱：shodex IC SI－524E 4mm×250mm（带shodex IC SI－90G 4mm×50mm保护柱）；流动相：3.6mmol/L Na₂CO₃；流速：0.7mL/min；抑制器：自动再生抑制器（具有去除CO₂功能）；检测器：电导检测器；检测池温度：室温；进样量：根据样液中BrO₃^－含量选择进样20～200μL。

4.样品测定

使用与小麦粉本底相关的阴离子标准混合工作溶液调整柱分离条件并观察柱清洗情况，保证和Cl^－的分离度达到要求，注入空白小麦粉提取液，确认在出峰处没有小麦粉本底干扰峰时，才可进行校准曲线和样品的测定，使用外标法定量。

5.结果计算

按式（6-5）计算试样中溴酸钾的含量

式中X——试样中BrO₃^－的含量，mg/kg；

ρ——由标准曲线得到样品溶液中BrO₃^－的含量，mg/mL；(https://www.xing528.com)

V——样品溶液定容体积，mL；

m——样品质量，g。

计算结果保留两位有效数字。若结果以KBrO₃计时，乘以系数1.31。计算结果小于本标准检出限0.5mg/kg（以计）时，视为未检出。

（四）注意事项

上述方法中所列仪器及配置仅供参考，同等性能仪器及配置均可使用。

甲醛别名蚁醛，相对分子质量30.03，是一种无色、有强烈刺激性气味的气体，其35%～40%的水溶液通称福尔马林。易溶于水、醇和醚。甲醛在常温下是气态，通常以水溶液形式出现。易溶于水和乙醇，醛是一种重要的有机原料，主要用于塑料工业、合成纤维、皮革工业、医药、染料等。一些不法商贩主要利用甲醛的防腐性能，加入水产品等不易储存的食品中。误食高浓度甲醛后，会出现呼吸道的严重刺激和水肿、眼刺痛、头痛，也可发生支气管哮喘。皮肤直接接触甲醛，可引起皮炎、色斑、坏死。经常吸入少量甲醛，能引起慢性中毒，出现黏膜充血、皮肤刺激症、过敏性皮炎、指甲角化和脆弱、甲床指端疼痛等。全身症状有头痛、乏力、胃纳差、心悸、失眠、体重减轻以及植物神经紊乱等。

甲醛的测定方法有：快速定性法中的间苯三酚法、品红亚硫酸法、溴化钾法；分光光度法中的乙酰丙酮显色法、变色酸显色法；高效液相色谱法。本文介绍水产品行业标准中的水产品中甲醛的定性测定方法。

（一）实验原理

利用水溶液中游离的甲醛与某些化学试剂的特异性反应，形成特定的颜色进行鉴别。

（二）试剂与仪器

1.试剂

以下试剂均为分析纯。

（1）1%间苯三酚溶液 称取固体间苯三酚1g，溶于100mL 12%氢氧化钠溶液中。此溶液临用时现配。

（2）4%盐酸苯肼溶液（此溶液临用时现配）；盐酸溶液（1+9，量取盐酸100mL，加到900mL的水中）；5%亚硝酸亚铁氰化钾溶液（此溶液临用时现配）；10%氢氧化钠溶液。

2.仪器

组织捣碎机；10mL纳氏比色管。

（三）实验步骤

1.取样

鲜活水产品：鲜活水产品取肌肉等可食部分测定。鱼类去头、去鳞，取背部和腹部肌肉；虾去头、去壳、去肠腺后取肉；贝类去壳后取肉；蟹类去壳、去性腺和肝脏后取肉。

冷冻水产品：冷冻水产品经半解冻直接取样，不可用水清洗。

水发水产品：水发水产品可取水发溶液直接测定，或将样品沥水后，取可食部分测定。

干制水产品：干制水产品取肌肉等可食部分测定。

2.样品处理

可直接取用水发水产品的水发溶液，进行定性筛选实验。将取得的样品用组织捣碎机捣碎，称取10g于三角瓶中，加入20mL蒸馏水，振荡30min，离心后取上清液作为制备液进行定性测定。

3.结果测定

取样品制备液5mL于10mL纳氏比色管中，然后加入1mL 1%间苯三酚溶液，2min内观察颜色变化。溶液若呈橙红色，则有甲醛存在，且甲醛含量较高；溶液若呈浅红色，则含有甲醛，且含量较低；溶液若无颜色变化，甲醛未检出。

该方法操作时显色时间短，应在2min内观察颜色的变化。水发鱿鱼、水发虾仁等样品的制备液因带浅红色，不适合此法。

（四）注意事项

（1）由于水产品中甲醛有些是内源性的，因此要注意不同的水产品内源性甲醛的含量。

（2）食品中甲醛定量分析参考吊白块的测定。

滑石粉，主要成分是滑石，相对分子质量260.8617。滑石主要成分是滑石含水的硅酸分子式为Mg₃［Si₄O₁₀］（OH）₂，纯品为白色或类白色、微细、无砂性的粉末，手摸有滑腻感。在水、稀矿酸或稀氢氧化碱溶液中均不溶解。长期大剂量服用硅酸镁，会发生肾硅酸盐结石，肾功能不全患者服用可出现眩晕、昏厥、心律失常或精神症状，以及异常疲乏无力等现象。滑石具有润滑性、抗黏、化学性不活泼、遮盖力良好、柔软、光泽好、吸附力强等优良的物理、化学特性。劣质面粉中加入滑石可增白粉色，增加重量。由于滑石粉中含有铅、砷、汞等重金属，食用后会引起中毒，严重者甚至会导致死亡。

滑石粉的测定方法有X射线衍射分析法、火焰原子吸收法、红外光谱测定、化学检验法等。本文介绍食品中滑石粉的国标方法火焰原子吸收法测定方法。

（一）实验原理

滑石粉主要成分是天然的水合硅酸镁，不溶于混合酸（硝酸+高氯酸），可与氢氟酸反应生成溶于水的镁盐。试样先用混合酸消化、过滤，将其他含镁物质分离除去，然后用混合酸和氢氟酸消化滑石粉，火焰原子吸收光谱法测定试液中的镁含量。根据镁含量，计算试样中滑石粉的含量。

（二）试剂与仪器

1.试剂

（1）以下试剂除特别注明外，均为分析纯试剂，试验用水符合GB/T 6682规定的一级水要求。

（2）氯化锶（优级醇）；硝酸；高氯酸；氢氟酸；盐酸；混合酸：硝酸+高氯酸（4+1）。

（3）氯化锶溶液（15g/L）称取氯化锶15g，加入盐酸45mL，用水稀释，定容至1000mL。

（4）镁标准储备液 准确称取金属镁（纯度大于99.99%）1.0000g或1.6580g氧化镁（纯度大于99.99%），加盐酸45mL溶解，用水稀释，定容至1000mL。贮存于聚乙烯瓶内，4℃保存。此溶液每毫升相当于1mg镁。

（5）镁标准使用液 准确吸取镁标准储备液10mL，用氯化锶溶液稀释，定容至1000mL，此溶液每毫升相当于0.1mg镁。

2.仪器

火焰原子吸收分光光度计（配镁空心阴极灯）；可调式电热板；聚四氟乙烯塑料坩埚（250mL，带盖）；定量滤纸（快速）。

（三）实验步骤

1.试样处理

准确称取均匀试样0.05～1.50g，放入聚四氟乙烯塑料坩埚中，加入15mL混合酸，盖上盖，置于电热板上加热，消化1～2h，至消化液无色透明为止。如果试样未消化好而酸液过少时，适当补加几毫升混合酸后继续加热消化。将坩埚取下，冷却至室温。用少量蒸馏水多次冲洗坩埚将坩埚的固体残渣完全转移到定量滤纸上，过滤，用蒸馏水冲洗4次，每次用水约50mL，要注意将滤纸边缘残留的液体冲洗干净。将滤纸及纸上的固体共同置于聚四氟乙烯塑料坩埚中，加入10mL混合酸和3mL氢氟酸，置于电热板上缓慢加热消化1～2h，直至无色透明为止。如果未消化好而酸液过少时，适当补加几毫升混合酸后继续加热消化。待坩埚中的液体接近干时，取下冷却。用氯化锶溶液将消化液转移至100mL容量瓶中，用氯化锶溶液定容。氯化锶溶液适当稀释后上机测定，滑石粉含量1%左右的试样一般稀释10倍。

2.空白试验

称取与试样处理相同的试样量，按照与试样处理相同的步骤进行空白试验，只是在将消化滤纸及纸上固体共同置于聚四氟乙烯塑料坩埚中时加混合酸，不加氢氟酸。空白试验的定容体积和稀释倍数要与试样处理相同。

3.镁标准系列溶液的配制

分别吸取0、0.50、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL镁标准使用液于100mL容量瓶里，用氯化锶溶液稀释定容，配制成0、0.50、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mg/L的标准系列溶液。

4.样品测定

仪器参考条件：波长285.2nm，仪器狭缝、空气及乙炔的流量、灯头高度、元素灯电流等仪器参考条件根据仪器的使用说明要求进行调节。适当调节燃烧器角度，使仪器测量线性范围的上限超过5.0mg/mL。将上机测定用试样液、空白液和镁标准系列溶液分别导入火焰进行测定。

5.结果计算

试样中滑石粉的含量按式（6-6）计算

式中 X——试样中滑石粉的含量，g/100g；

ρ₁——测定用试样液中镁的浓度，mg/L；

ρ₀——测定用空白液中镁的浓度，mg/L；

V₁——试样消化液定容体积，mL；

f₁——试样消化液稀释倍数；

5.27——镁换算成滑石粉的系数；

m——试样质量，g。

工业级矿物油也称工业白油级白油，是以加氢裂化生产的基础油为原料，经深度脱蜡、化学精制等工艺处理后得到，可用于化学、纺织、化纤、石油化工、电力、农业等。矿物油深加工后提取食品级白油，作为加工设备的润滑剂，通心面、面包、饼干、巧克力等食品的脱模剂等。近年来，一些不法商贩或厂家为了牟取暴利、以次充好，用工业级矿物油对大米进行上光处理、加工饼干等。矿物油的组成与食用油完全不同，它不能被人体吸收，不易于挥发，含有多种有毒、有害的物质，食用或摄入后会对人体造成不良影响甚至危及生命。

工业用矿物油的检测方法有：国标皂化法、荧光反应法、红外光谱法、薄层色谱法、毛细管气相色谱法、试剂盒快速检测方法等。本文介绍国标－皂化法测定饼干等食品中的矿物油。

（一）实验原理

矿物油与油脂不同，不能发生皂化反应。油脂能与碱起皂化反应，其反应生成物可溶于热水，呈透明状，而矿物油不能被皂化，也不溶于水，利用此特性可检出矿物油。

（二）试剂与仪器

1.试剂

石油醚，矿物油，氢氧化钾，无水乙醇。

2.仪器

蒸发皿，具塞三角瓶，比色管，水浴锅，测汞回流装置。

（三）实验步骤

1.前处理

取大约100g磨碎、混匀的被测饼干等（视含油量而定）置于500mL具塞三角瓶，加入石油醚浸没试样，振摇15min，静置过夜，过滤；收集滤液放于蒸发皿中，水浴上挥去石油醚，油脂供鉴定矿物油用。采用相同的方法提取阴性试样、阳性试样中的脂类。阴性对照试样是不含矿物油的饼干、大米、食用油等。阳性对照试样，在不含矿物油的试样中按照1%的比例加入矿物油。

2.测定

分别取前处理步骤中的被测试样、阴性对照试样、阳性对照试样的脂类提取物质各10g，食用油直接取样10g置于250mL三角瓶中，加入600g/L氢氧化钾溶液10mL，无水乙醇25mL，接上冷凝管在沸水浴中冷凝回流5min，取下趁热加入沸水25mL，摇匀，观察结果。

3.结果判定

阴性对照溶液应为透明。阳性对照溶液应为混浊或有小油珠存在。被检试样如果溶液透明，则可认为试样中不含矿物油；如果试样溶液混浊或有小油珠存在，则可认为试样中含有矿物油。

（四）注意事项

工业用矿物油的定量方法较为复杂，应先用常见的工业用矿物油为样品，用毛细管气相色谱法建立指纹图谱，再对可疑样品进行同样分析方可定量。