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如何配制适合小孢子培养的培养基?

时间:2023-05-31 理论教育 版权反馈
【摘要】:NLN13培养基以配制10升NLN13培养基为例,化学试剂准备:溶液1:称量肌醇1克,甘氨酸20毫克,硫胺素5毫克,吡哆醇5毫克,烟碱酸50毫克,生物素0.5毫克,谷氨酰胺8克,丝氨酸1克,谷胱甘肽0.3克,加蒸馏水定容至1升。溶液2:称量KNO31.25克,MgSO4·7H2O 1.25克,KH2PO41.25克,定容至1升。培养基配好后密封置于4℃冰箱冷藏保存。具体配制方法:称取蔗糖1.3千克,加入4升蒸馏水,配制方法同NLN13培养基。

如何配制适合小孢子培养的培养基?

(1)NLN13培养基

以配制10升NLN13培养基为例,化学试剂准备:

溶液1:称量肌醇1克,甘氨酸20毫克,硫胺素5毫克,吡哆醇5毫克,烟碱酸50毫克,生物素0.5毫克,谷氨酰胺8克,丝氨酸1克,谷胱甘肽0.3克,加蒸馏水定容至1升。

溶液2:称量KNO31.25克,MgSO4·7H2O 1.25克,KH2PO41.25克,定容至1升。

溶液3:称量Ca(NO32·4H2O 5.0克溶于蒸馏水定容至1升。

溶液4:200×Fe-EDTA 50毫升定容至1升。

溶液5:1000×微量元素1毫升定容至1升。

具体配制方法:称取蔗糖1.3千克,加入4升蒸馏水,搅拌溶化后加入溶液1并搅拌均匀,依次加入溶液2、溶液3、溶液4、溶液5并搅拌均匀,定容至10升。搅拌均匀后,采用HCl调节pH值至5.8~6.0。

培养基的灭菌:在超净工作台上采用0.22微米滤膜进行初过滤,再用1升过滤器在真空泵辅助下进行过滤灭菌(美国CORNING公司生产)。培养基配好后密封置于4℃冰箱冷藏保存。(www.xing528.com)

(2)B5培养基

以配制10升B5培养基为例,化学试剂准备:

溶液1:称量肌醇1克,硫胺素0.1克,吡哆醇10毫克,烟碱酸10毫克,ABA 4毫克,加蒸馏水定容至1升。

溶液2:KNO325克,(NH42SO41.34克,MgSO4·7H2O 2克,NaH2PO41.20克,定容至1升。

溶液3:CaCl2·2H2O 1.5克,加蒸馏水定容至1升。

溶液4:200×Fe-EDTA 50毫升定容至1升。

溶液5:1000×微量元素1毫升定容至1升。

具体配制方法:称取蔗糖1.3千克,加入4升蒸馏水,配制方法同NLN13培养基。

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