草莓无菌组培技术流程详解

一、草莓的组织培养

草莓是蔷薇科草莓属宿根性多年生常绿草本植物，是世界性水果。但是草莓生产长期以来都依靠传统的分株繁殖法生产种苗，病毒病成为草莓生产的瓶颈。通过茎尖脱毒，用试管苗进行繁殖，是解决草莓生产中这一问题的途径。草莓组培技术流程以“丰香”草莓为例。

（一）外植体选择与处理

1．外植体的选择与处理

自田间选取健壮草莓母株上生长充实而小叶尚未展开的匍匐茎顶端约3～4cm长的顶芽，用自来水冲洗2～3h后，在超净台上进行灭菌处理。先用小镊子将匍匐茎的外部大叶摘除，再用70%酒精处理30s，用饱和漂白精液浸泡15min，然后用无菌水冲洗3～5遍。

2．茎尖的剥取与无菌接种

在双筒解剖镜下由外向内逐层剥去幼叶，直至半球体的顶端分生组织充分暴露出来，切取茎尖接种于诱导培养基上（pH值为5.6）。培养基的配方有两种：①增殖培养基：MS＋BA0.2～0.5mg·L^－1；②生根培养基：草莓是比较容易在培养基上生根，1／2MS就可达到最好的生根效果，35d后，生根率达100%，长4.0～5.0cm。(www.xing528.com)

3．培养

培养条件：光照2000lx，12～14h·d^－1，温度25±2℃。

4．试管苗的驯化

将高于3cm的生长健壮的试管苗生根培养20d后，将生根试管苗瓶口打开，培养室内放置2～3d取出后洗净其根部的培养基，移栽到炼苗基质上，温度保持在15～25℃，相对湿度85%～90%，适当遮阴，后期逐渐通风，增加光照，常规炼苗管理。

移栽于蛭石上的成活率最好，40d后，达到98%；珍珠岩其次，为91%；最低的是蛭石＋珍珠岩＋草炭混合基质，只有63%。就生长状况而言，驯化成活的幼苗在蛭石＋珍珠岩＋草炭混合基质上的株高最高，平均为3.62cm，总根长以草炭最好，达2.36cm，而发根数以蛭石最多，平均有5.4条／株。