百合种球组培脱毒技术解决病毒感染问题

一、百合花卉的组织培养

百合为百合科百合属，约有100多种，是世界名花，也是我国的传统花卉，它是一种食用、药用、观赏兼用的多年生草本植物。但百合种球病毒感染严重影响了百合生产，已发现导致百合种球退化的病毒及其类似病原达12种之多，其中危害最为严重的有百合潜隐病毒、郁金香碎色病毒及黄瓜花叶病毒，通过组培脱毒是解决问题的主要途径。百合脱毒组培技术流程具体如下。

1．外植体的消毒

将新鲜东方百合种球鳞茎4℃冷藏处理一个月后，去除百合种球的外表鳞片，先用自来水冲洗30min，再用70%的酒精浸泡30s，无菌水冲洗2遍，后用已消过毒的滤纸将种球表面的水分吸干，再投入已消毒的瓶中，用0.1%升汞水浸泡7min，并不间断摇荡瓶子，以确保外植体得到全面彻底的消毒，然后用无菌水冲洗5遍。在显微镜下，剥除内鳞片，观察球形生长点，迅速切取约0.2mm茎尖，快速接种到已打开瓶口的培养基中。

2．培养基配制

基本培养基：MS，pH：5.8，琼脂：7%，蔗糖：30g·L^－1。

芽诱导培养基：MS＋2.0mg·L^－16-BA＋0.1mg·L^－1NAA。

增殖培养基：MS＋1.0mg·L^－16-BA＋0.2mg·L^－1NAA。(www.xing528.com)

生根培养基：1／2MS＋0.4mg·L^－1NAA＋1～4%AC（活性炭）。

3．培养条件

光照2000～3000lx，12h·d^－1。

4．驯化与移栽

先将健壮的生根苗在自然温度下开瓶驯化，然后移栽假值。容器：塑料营养钵，每钵假植150株左右。基质：腐殖土∶锯末（体积）＝1∶1，假植在塑料大棚中进行，前4d覆盖一层遮阴50%的遮阳网，以后渐渐掀开。水分管理根据苗的酌情掌握喷雾时间、喷雾次数。7d用1／2MS溶液喷雾一次补充营养。

百合的组培技术比较成熟，脱毒方法主要有茎尖培养、热处理结合茎尖培养、花药培养等，均可获得较好效果。