【摘要】：3．花蕾采集与预处理具体步骤包括：摘取处于单核期的花冠长度为21～23mm的花蕾→7～8℃低温下约12d。另一种是自然散落法，把花药接种在液体培养基上，经过一段时间的培养，药室自然开裂，小孢子从花药里散落出来，把花药取出，制成小孢子悬浮液进行培养。
四、方法步骤
（一）番茄子房的培养
1．外植体选择及处理
开花前3～5d，取生长健壮、无病虫害的番茄花蕾→流水冲洗0.5～1h后→在超净台上75%酒精浸泡30s→10%次氯酸钠浸泡5～6min→无菌水漂洗4次（第1次漂洗20s，后3次各漂洗1min）→无菌滤纸吸干水分。
2．接种
用接种工具剥去花被→切除花梗→取子房，竖直接种于诱导培养基上。
3．培养
子房接种后置于25～27℃、12～16h·d－1的散射光下培养。经过1个月左右，在子房壁上长出愈伤组织，再培养一段时间分化出芽。当芽苗2cm以上时转移到生根培养基上生长，很快形成幼根。
4．驯化移栽
当根长1～2cm时，移到温室内不开瓶驯化3d。出瓶后栽植于营养土中覆膜保湿，4～5d后就可去膜定植。
（二）胚珠的培养(www.xing528.com)
1．外植体选择及处理
葡萄落花后35d采回果穗，将果粒用清水冲洗数次→在超净工作台内用75%酒精消毒1min→3%次氯酸钠溶液消毒15min→用无菌水漂洗3～4次。
2．接种
将消毒后的果粒切开，取出胚珠，接种于内装15ml胚珠发育培养基上，培养120d。培养条件是：温度为（25±1）℃、每日光照为15h、光强为2000lx。统计胚发育率，将绿色胚珠作为发育胚统计。
3．转接
将上述培养后的胚珠从胚珠顶部切开（可大大提高胚的萌发率）→接种到分化培养基上，培养15d，就可看到葡萄幼苗，但这时还没有根。
4．生根培养
将上述葡萄幼苗，转接到生根培养基上，30d后，可看到葡萄苗长出4～5条根、3～4个节。
5．驯化移栽
将上述试管苗进行常规的驯化移栽，半个月后移到大田栽植，进行常规田间管理。葡萄发育正常，能正常开花结果。
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