家庭组培室布局与设计需要注意的事项

四、家庭组培室的布局与设计

开展家庭组培是一件看似较难实际并不太难的事情，具备组培基本知识及有过实际工作经验者应该可以从事，若一知半解或认为只不过是几个瓶瓶罐罐，肯定不会成功，徒费人、财、物。家庭组培同样必须遵循组培的规律、程序和原则，一步也不可少。家庭组培讲究经济实惠，能省则省，能简则简，能代则代，少花钱多办事，需要多开动脑筋（见彩页图1-3）。

由于家庭组培是利用家庭空闲房间，甚至书房或车库，布局时不可能分区，全部操作可在一个房间内完成，但环境必须清洁卫生，通风、光线良好，一般家用空调、冰箱、水池、贮物柜应俱全并放置恰当，安装日光灯和紫外线灯。从外植体进入直至瓶苗的培养顺序不要倒置。

（一）器材和药品的准备

①接种箱，可按图1-3自制以代替超净工作台，内装日光灯、紫外线灯。

②高压灭菌锅，可用家用高压锅代替。

③1%天平。

④不锈钢锅或铝锅，用于煮制培养基。

⑤长柄调羹一个，用于煮制和分装培养基。

⑥未脱脂棉花、纱布和线若干，用于做瓶口的塞子。

⑦牛皮纸、橡皮圈若干，用于包瓶头和扎包头纸。

图1-3　接种箱(www.xing528.com)

⑧酒精灯1盏，解剖刀1把，刀片若干，镊子2把，10ml、100ml量筒各一个，2m l移液管1只，药棉若干。

⑨其他。玻璃培养器材可用不同大小之罐头瓶、玻璃杯或耐高温塑料杯、纸杯；所有药品激素均可在花卉市场上购买。

（二）培养基的配置和消毒

培养基每次配置1升为宜。煮制后用pH试纸测定后，分装成35～40瓶，塞好棉塞，包好包头纸（棉塞不能使用脱脂棉，棉塞的松紧以手提棉塞瓶子不滑落为宜）。然后放入家用高压锅里灭菌，待高压锅喷嘴喷出蒸汽时，扣上压力阀，从压力阀喷气时起计时，连续维持20分钟后关火，压力消失后，开锅，取出配养基，放入接种箱内待用。灭菌后的培养基放置三五天后，若无霉菌生长才能使用。如有霉菌长出，说明灭菌时间不够，需要适当增加灭菌时间。

（三）外植体灭菌

将灭菌后的培养基、无菌水、消毒药水及使用的器材放入接种箱内，因接种箱内的体积相对较小，所以所用的一切物品都要有序地摆放在相应的位置上，箱内湿度较大，点酒精灯要用打火机。准备好倾倒污水、污物的容器，尽可能地大一些。把所有的物品放置好以后，将一装有福尔马林的500ml瓷杯或大碗放入箱内（最好不要使用玻璃杯，因反应时温度较高，容易炸裂）。倒入2～5g高锰酸钾（PP粉）使其蒸气充满箱内，达到灭菌的效果。这时要将接种箱的通气孔和操作孔封闭好，避免甲醛蒸气很快散尽。待箱内蒸气散尽后，才能开始工作，这段时间大约需要5～10h。

灭菌时，揭去密封在接种箱通气孔和操作孔上的密封物，取出熏蒸用的瓷杯，将材料送入接种箱内，开启紫外线灯，20min后关闭紫外线灯，开启照明灯，即可开始取材、进行灭菌步骤然后将材料接入培养基。操作时一定要树立无菌观念，每接种一瓶用酒精擦拭手指。要注意防火，防止酒精起火。打开瓶塞时，要将瓶口置于酒精灯上方，用右手的无名指和小指夹住棉塞尾，将棉塞拔出，棉塞应用手指夹住，材料接入培养基后，将瓶口在酒精灯上烧灼一下，棉塞也烧灼一下，然后在酒精灯火焰上方塞好，扎好包头纸，用铅笔标明品种、接种日期、编号等，然后重复下一瓶。

用接种箱污染率也是很低的，操作熟练后几乎没有什么污染发生。接种后愈伤组织分化、小苗分化、生长状态与在超净台上接种的没有什么两样。

（四）培养

在家庭的业余培养条件下培养无菌容器苗要注意充分利用自然条件，接种后的培养瓶可以放在有较强散射光的地方，如靠窗的条桌或窗台，但要避免日光直射，一般室温在22～28℃时都能正常生长，不是特殊的品种不需要特殊的护理。如室温太低，可以用塑料薄膜做一个简单的培养箱，里面装一两个15～25W的白炽灯，既可以辅助光照，也可以提高培养的温度。夏天温度过高时，应开启空调，没有空调的，降温虽然困难一些，但只要加强通风避免阳光直射，大多数试管苗还是可以耐受的，不至于死去。

（五）驯化栽培

当小苗长到一定大小的时候，可配置一些生根培养基将小苗转入生根培养，待长出一定根系时，就可以出瓶种植了。小苗出瓶种植的时候一定要注意以下几个方面：适当降低温度、增大湿度、严格控制杂菌危害、保证种植介质的疏松透气、保证适当的光照。驯化栽培时通常用蛭石、木屑、稻谷壳混合作种植基质，小苗种植后用百菌清喷雾浇根，盖上塑料薄膜，少量的小苗干脆用玻璃杯盖住，大约15d后就能揭去覆盖物，便可进行正常管理了。