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影响药敏试验结果的因素及其解决方法

时间:2023-05-14 理论教育 版权反馈
【摘要】:培养基成分培养基成分不但影响敏感株的生长繁殖,并可影响到抑菌圈的直径。磺胺类药物用琼脂平板法试验时,不能含蛋白胨,因为蛋白胨会使磺胺失去作用。因此,接种量要适宜,接种量多,即使最敏感的菌株也不能抑制其发育,影响实验结果。

影响药敏试验结果的因素及其解决方法

45.影响药敏试验的因素有哪些?

(1)器材 抗菌药物敏感性试验是利用微生物学方法进行的,其用量极微,实验仪器的规格和精确度会直接影响实验结果,因此必须严格要求,试管、吸管、培养皿和其他器皿,尤其是定量用的吸管,均选择用中性、硬质一级品,并且必须经过彻底灭菌。

(2)培养基成分 培养基成分不但影响敏感株的生长繁殖,并可影响到抑菌圈的直径。不同批号的蛋白胨,所含的氨态氮的量和总量不同,抑菌圈大小也有一定差别,氯化钠及琼脂中的钙、镁离子影响链霉素、新霉素的扩散,尤其是氯化钠,对链霉素影响最大,含量越高,抑菌圈越小,甚至不出现反应。但氯化钠反而有助于多黏菌菌素的扩散。琼脂含量和平板厚度也影响抑菌圈的大小,含量大,影响抗菌素的扩散,一般以1.3%~1.6%的浓度较合适;琼脂层过厚抑菌圈也较小,以2~4毫米最为适宜。磺胺类药物用琼脂平板法试验时,不能含蛋白胨,因为蛋白胨会使磺胺失去作用。血清成分的吸附或结合作用,会使金霉素中药提取物抗菌作用减弱。

(3)敏感菌株 菌种的敏感度差别较大,如金黄色葡萄球菌青霉素最敏感,四联球菌对四环素族最敏感,大肠杆菌氯霉素、多黏菌素敏感。因此,接种量要适宜,接种量多,即使最敏感的菌株也不能抑制其发育,影响实验结果。

(4)标准液和被检液 要用同一方法和在同一条件下配制,避免因操作方法不一致而造成误差。

(5)培养时间 细菌在发育过程中,对数期繁殖最快,以后进入稳定期和衰亡期,必须掌握这一规律和特性,以便达到所需要的试验目的。时间(一般以37℃16~18小时为适宜)过短则细菌繁殖量少,过长则敏感性降低,抑菌圈不清楚。(www.xing528.com)

(6)pH 对实验结果有显著的影响。新霉素、链霉素在碱性环境中活性最大,而在酸性时抑菌圈缩小,四环素族以弱酸近中性为宜,青霉素、氯霉素以中性为宜。

【注释】

[1]心音,见问题22。

[2]1磅=0.4536千克。1千克力/厘米2=15磅/平方英寸,在实际工作中通常写为:“高压x磅”。

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