猕猴桃细胞膜渗透率实验：生理与保鲜探究

实验3－2　猕猴桃细胞膜渗透率的测定

一、基本原理

猕猴桃细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。细胞膜具有选择透过性功能，猕猴桃细胞之间以及细胞与外界环境之间发生的一切物质交换都必须通过细胞质膜进行。猕猴桃组织后熟衰老过程中，细胞质膜功能活性下降，膜通透性增强，出现细胞内电解质向外渗漏。猕猴桃组织在受到不良环境胁迫时，如高温、低温、振荡伤害或病原菌侵染时，细胞膜的完整性和功能也会遭到不同程度的损伤，往往表现为膜透性增强和电解质外渗（主要是钾离子）速度加快。

猕猴桃组织细胞膜受损伤后，细胞膜内电解质外渗，会引起提取液的电导率增加。通过测定猕猴桃组织浸提液或外渗液的电导率，可以了解猕猴桃细胞膜通透性的变化，反映猕猴桃抗逆性的强弱或受到伤害的程度。一般利用相对电导率表示细胞膜渗透率以及细胞膜受到伤害的程度。

相对电导率（C_e）为测试材料活组织提取液的电导率（C₁）与测试材料活组织被杀死后提取液的电导率（C₂）的百分比，即：

C_e＝C₁/C₂×100%

煮沸杀死猕猴桃活组织时，猕猴桃细胞完全被破坏，细胞内电解质完全进入浸提液，因此，C_e实际表示在一定时间内，细胞内电解质渗出量占总电解质的百分比。

二、仪器及用具

电导率仪、电子天平、真空干燥器、真空泵、真空压力表、恒温水浴锅、小烧杯（100 ml）、大试管、带十字头玻璃棒、不锈钢打孔器、单面刀片、摇床。

三、实验步骤(www.xing528.com)

（一）取样

用直径为1 cm的不锈钢打孔器将果实的果皮切成圆片，取15个圆片置于50 ml的小烧杯中，加20 ml蒸馏水后缓慢搅拌，放置30 min后，用DDS－11AT型电导仪测定电导率C₁，之后将小烧杯于沸水浴中煮10 min，冷却后加蒸馏水至20 ml，测定电导率C₂。

（二）测定过程

准确加入20．0 ml去离子水，浸没果肉圆片，放入真空干燥器中。真空干燥器连接上真空表和真空泵，抽气，以抽出细胞间隙中空气，使去离子水进入细胞间隙。将真空干燥器的压力控制在0．04～0．06 MPa，真空渗漏10 min。然后，缓缓放入空气，水即被吸入组织中而使圆片下沉。

四、实验结果与计算

记录测定结果，

相对膜透性＝（C ₁/C₂）×100%

按上面的公式计算相对电导率，重复三次。