首页 百科知识 免疫血清制备:方法与注意事项

免疫血清制备:方法与注意事项

时间:2024-03-10 百科知识 版权反馈
【摘要】:如用加有血清或血液的培养基时,则必须将血液成分去除干净。为了避免产生抗正常组织抗体,可用同种动物的组织制备抗原。例如抗猪瘟血清的制备,可用人工感染猪的血清或脾脏作为抗原来免疫猪。2.免疫动物的选择选用健康的成年动物。一般情况下,雄性较雌性的免疫效果好,处于怀孕期和哺乳期动物免疫效果差。

免疫血清制备:方法与注意事项

一、免疫血清的制备

由于抗原的性质不同,免疫的具体方法和程序也不同,下边就免疫中几个基本原则加以叙述。

1.抗原

(1)细菌抗原保证为光滑型。如用加有血清或血液的培养基时,则必须将血液成分去除干净。

(2)病毒抗原培养应选无血清培养液,所用培养细胞最好与免疫动物同种。为了避免产生抗正常组织抗体,可用同种动物的组织制备抗原。例如抗猪瘟血清的制备,可用人工感染猪的血清或脾脏作为抗原来免疫猪。

(3)球蛋白抗原在使用前必须纯化,并用不完全或完全弗氏佐剂乳化。

(4)弗氏佐剂:

       羊毛脂        40g

       石蜡油        60ml

       卡介苗(B∶C∶G)   10~20mg/ml

将羊毛脂与石蜡油干烤灭菌,用前研磨混合,在抗原乳化时加入卡介苗。如不加入卡介苗,则成为不完全弗氏佐剂。

2.免疫动物的选择

选用健康的成年动物。年龄过小或过老者因免疫功能不够健全常不采用。一般情况下,雄性较雌性的免疫效果好,处于怀孕期和哺乳期动物免疫效果差。

3.免疫途径

最常用者有皮下、静脉、腹腔、脚掌、腘淋巴结等,有时也选用角膜、肌肉等注射途径。

4.注射程序

因抗原不同而不同。下面以实验室常用的几种免疫血清注射程序为例加以说明:

(1)抗猪瘟血清的制备过程

第一次兔化弱毒(1∶100脾淋毒)     2ml(www.xing528.com)

第二次兔化弱毒(1∶100脾淋毒)     10ml(间隔10天*)

第三次猪瘟强毒(血毒)         100ml(间隔10天*)

第四次猪瘟强毒(血毒)         200ml(间隔10天*)

第五次猪瘟强毒(血毒)         350ml(间隔10天*)

第六次猪瘟强毒(血毒)         500ml(间隔10天*)

最末一次,注射后15天,采血,分离血清。

*间隔时间,指上一次注射时间。

(2)兔抗猪球蛋白血清制备程序

每隔10天注射一次,按下面剂量进行:

第一次5mg   第二次5mg    第三次10mg

第四次10mg   第五次10mg    第六次20mg

末次注射后10天试血,合格者采血,分离血清。

(3)羊抗兔球蛋白血清制备程序

每隔10天注射一次,按下面剂量进行:

第一次50mg  (兔球蛋白)   第二次50mg  (兔球蛋白)

第三次100mg  (兔球蛋白)   第四次100mg  (兔球蛋白)

第五次150mg  (兔球蛋白)   第六次150mg  (兔球蛋白)

末次注射后20天试血,合格者采血,分离血清。

免责声明:以上内容源自网络,版权归原作者所有,如有侵犯您的原创版权请告知,我们将尽快删除相关内容。

我要反馈